科学家终于找到不依赖病毒的T细胞工程化方法

2018年7月11日《Nature》杂志上报告了一种非病毒的方法，它用一种强大的分子“切割和粘贴”系统，重写人类T细胞中的基因组序列。它依赖于电穿孔，是一种将电场施加到细胞上使其膜暂时更具渗透性的过程。加州大学旧金山分校(UCSF)的研究人员发现：当一定数量的T细胞，DNA和CRISPR“剪刀”混合在一起然后暴露在适当的电场中时，T细胞将会在吸收这些元素，精确地将特定的基因序列整合到基因组中的CRISPR编程位点。

经过近一年的反复试验，研究人员确定了T细胞群，DNA量和CRISPR丰度的比例，结合使用适当参数传递的电场，可以有效且准确地对T细胞基因组进行编辑。为了验证这些发现，Roth指示CRISPR用绿色荧光蛋白(GFP)标记一系列不同的T细胞蛋白，结果表明：这种操作是高度特异性的，脱靶的几率非常低。

实验结果表明：在不使用病毒的情况下，研究人员能够生成大量经过重新编程的CRISPR工程化细胞，表达出新的T细胞受体。当转移到植入人黑素瘤肿瘤的小鼠中时，工程化的人T细胞进入肿瘤部位并显示出抗癌活性。