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疫苗生产用的细胞培养基——SFRE 199

2018-11-19 10:33来源:缔一生物


目前,动物细胞大规模培养已广泛应用于人用疫苗、兽用疫苗、基因治疗药物等生物制品的生产。理想目标是实现细胞的高密度培养、高密度表达,保证大规模生产的产品质量。其中,用于细胞大规模培养的培养基是一大关键要素。


传统疫苗生产多采用M199、DMEM、MEM等培养基加新生牛血清的方式,但由于血清成分的复杂性和不确定性,采用无血清细胞培养基已成为疫苗生产的发展趋势。


SFRE 199是对M199培养基的改良型。和M199相比,SFRE 199显著升高了8种氨基酸的浓度,包括精氨酸、半胱氨酸、胱氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、甘氨酸、组氨酸、酪氨酸,也升高了葡萄糖的浓度,使能获得**的细胞生长而不表现出毒性。另外,加入了硫酸锌、丙酮酸钠和胰岛素,降低了硝酸铁、黄嘌呤和碳酸氢钠的浓度,还添加了半乳糖,以避免乳酸过度积累,并使细胞在维持的延长期内,pH值保持在生理范围。


SFRE 199分为2种:SFRE 199-1与SFRE 199-2。其不同在于,前者含有Hank's盐。而后者为Earle's盐。SFRE 199最初用于Bak细胞(原代狒狒肾细胞)的生长和维持。国外有研究表明,SFRE 199不加胎牛血清即可用于培养Bak细胞,它与添加胎牛血清的常规培养基(M199、MEM)相比,细胞生长速率、产量和蛋白容量均相同,群体二倍分裂时间缩短,而生长的病毒滴度无明显差别1,2



Bak细胞超微结构。未受病毒感染的Bak细胞用SFRE 199-1培养后,胞浆中出现更多糖原样小颗粒(和传统培养基相比)2


Vero细胞是世界卫生组织和我国生物制品规程认可的疫苗生产细胞系,常用于生产狂犬病疫苗、流感疫苗、脊髓灰质炎疫苗、肠道病毒71疫苗等。Vero细胞无血清培养基的工艺开发,已成为各国的热点。国外有研究表明,SFRE 199-1可作为无血清培养基的基础成分,用于Vero细胞的培养3,并在Vero细胞静置培养中,以SFRE 199-1为基础的无血清培养基可获得细胞生长效果4



总之,对传统培养基进行改良以获得更高的细胞活力和密度、获得更快的病毒增殖速度和更高的病毒滴度,已成为各个药厂不断努力的目标。细胞培养基的高品质和个性化,对目标的实现尤为重要。北京缔一生物作为国际知名的细胞培养基生产商HiMedia的国内总代理,愿与各个药厂竭诚展开合作,提供国际品质的优质产品,为中国的生命科学助力加油!


注释:


1. 吴长安. 无血清化学限定培养基对原代细胞的培养及其对病毒的敏感性. 国外医学.生物制品分册. 1981, 4:190-191


2. S.A.Weiss, et al. Chemically defined serum-free media for the cultivation of primary cells and their susceptibility to viruses. In Vitro.1980,16(7):616-628


3. Jack Litwin. The growth of Vero cells in suspension as cell-aggregates in serum-free media. Cytotecnology 10:169-174,1992


4. Jack Litwin. The growth of Vero cells as suspended aggregates in serum-free medium.Animal Cell Technology, 1992: 414-417


HiMedia简介:

1975年成立,国际知名的生物科学公司。近50年一直致力于细胞培养基和微生物培养基的研发和生产,是全球通过WHO GMP认证的培养基生产厂家,并具有ISO9001,ISO13485:2003认证,CE认证和FDA注册登记。HiMedia公司具有先进的生产工艺和严格的质量管理体系,为制药、疫苗生产、食品工业、实验室科研等领域,提供高质量的产品。其产品已行销全球140多个国家。


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