HiMedia产品解疑
(使用脱水培养基经常遇到的问题)
问题
可能的原因
建议
pH值不对
1.过热
2.灭菌时间太长
3.使用了碱性玻璃,容器内有残留或水不纯
4.反复熔化,导致成分水解
5.在高温下保存太久
6.在25℃以上测量的pH值
7.蒸馏水的初始pH值有问题
1.XLD琼脂(M031)标准颜色——红色透明
2.蒸馏水呈酸性pH值,使得XLD琼脂呈现雾状。
1.不要过热。
2.灭菌应按规定的时间和温度进行。
3.检查玻璃器皿的pH值。
4.仅取所需数量的培养基进行复溶,并避免多次重熔。避免准备过量的培养基。
5.将培养基存放在干燥通风的室内,避免极端的温度。
6.含有碳水化合物的培养基过热,会导致pH值急剧变化
7.蒸馏水的pH值应在6.0-7.0之间。
因此,应严格按照规定进行灭菌。对于含有额外添加碳水化合物的培养基,应将培养基和碳水化合物分别灭菌再混匀。
不完全溶解
1.加热不充分,缺少搅拌
2.在25℃以上测量的pH值
3.用的容器太小(偶尔有些培养基自身即带沉淀,如BS琼脂)
4.容器有残留或使用了碱性玻璃
1.灭菌前煮沸培养基。
2.检查蒸馏水的pH值。pH值应在6.0-7.0之间
3.使用足够大的容器。
4.检查玻璃器皿的pH值。
培养基变暗
1.培养基过度加热
2.培养基称重不正确,过量
3.不正确的pH值
4. 反复熔化
5.培养基过期或变质
2.不要加入过量的干粉。按照克/升复溶干粉。
3.检查蒸馏水的pH值,应为6.0-7.0
4.避免再熔和再制备培养基。
5.在有效期内使用培养基。
凝胶变软
1.琼脂没在溶液中,脱水培养基没完全复溶
2.琼脂发生酸水解
3.加入接种液导致琼脂稀释,而未能补足。
1.检查蒸馏水的pH值。 蒸馏水的pH应该介于6.0-7.0之间。
2.蒸馏水的酸性pH导致琼脂水解,溶解不完全。
3.严格按照规定的说明进行灭菌。避免过度灭菌,这可能导致凝胶变软。
菌落没有长出
因为培养基的原因:
1.培养基反复熔化
2.过度加热
3.不充分的混匀
4. 因成分稀释,而未能弥补其鉴别特性
6.使用了不正确的配方
1.避免反复重熔。在给定时间内只复溶需要量的培养基。
2.不要过热。
3.确保适当的混匀。
4.使用适量的接种菌量。请勿在有效期过后使用菌液制备用培养基。
6.根据说明书使用规定量的培养基。
因为增补剂的原因:
1.增补剂过期或变质
2.增补剂未很好的复溶。所加浓度不够。增补剂添加不正确,如培养基过热或浓度有误。
3.增补剂未正确与培养基混匀。
1.在效期内使用增补剂。
2.根据说明书上的规定,使用规定量的增补剂,配置为规定浓度。
3.确保增补剂与培养基正确混匀。
培养基颜色变化(含指示剂的培养基)
培养基pH值在灭菌前后没有在规定的范围内
1.检查用于制备蒸馏水的水的pH值。蒸馏水pH值应在6.0-7.0之间。
2.在pH漂移的情况下,可使0.1N Cl/0.1N NaOH调节pH。
培养基有沉淀
通常发生在含无机盐的培养基
1.建议使用蒸馏水溶解干粉培养基。也可以使用纯净水。
2.推荐条件之外的培养基过热或过度灭菌,会导致沉淀。
3.这通常在含有磷酸盐的培养基上观察到。应该进行水的兼容性检查。
制备好的培养基储存时变暗
1.培养基含糖浓度高,并被持续加热
2.培养基存储温度高
1.不要过热
2.应按照推荐的时间和温度进行灭菌
3.避免持续地熔化
4.避免所配制的培养基长时间暴露于50°C以上的高温。
流体硫乙醇酸盐培养基中的环不匀称或环发生扭曲(M009)
1. 琼脂消化不当
2. 沸腾不足
1.高压前保证琼脂颗粒的完全消化,以避免出现相分离。
2. 正确消化、高压和冷却,不扰动培养基,才会形成密致环。
制备好的流体硫乙醇酸盐培养基(M009)有松弛环
配制好的培养基的扰动
再加热和冷却后,环可恢复原来的形状
在高压灭菌罐中,流体硫乙醇酸盐培养基有双环形成
因为氧气吸收
确保正确夹紧底部通气口。如果松动,吸收大气中的氧气会导致双环形成。
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