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HiMedia产品解疑

2019-03-21 15:35

HiMedia产品解疑

(使用脱水培养基经常遇到的问题)


问题

可能的原因

建议

pH值不对

1.过热

2.灭菌时间太长

3.使用了碱性玻璃,容器内有残留或水不纯

4.反复熔化,导致成分水解

5.在高温下保存太久

6.在25℃以上测量的pH值

7.蒸馏水的初始pH值有问题

2.png

1.XLD琼脂(M031)标准颜色——红色透明

2.蒸馏水呈酸性pH值,使得XLD琼脂呈现雾状。

1.不要过热。

2.灭菌应按规定的时间和温度进行。

3.检查玻璃器皿的pH值。

4.仅取所需数量的培养基进行复溶,并避免多次重熔。避免准备过量的培养基。

5.将培养基存放在干燥通风的室内,避免极端的温度。

6.含有碳水化合物的培养基过热,会导致pH值急剧变化

7.蒸馏水的pH值应在6.0-7.0之间。

因此,应严格按照规定进行灭菌。对于含有额外添加碳水化合物的培养基,应将培养基和碳水化合物分别灭菌再混匀


不完全溶解

1.加热不充分,缺少搅拌

2.在25℃以上测量的pH值

3.用的容器太小(偶尔有些培养基自身即带沉淀,如BS琼脂)

4.容器有残留或使用了碱性玻璃

1.灭菌前煮沸培养基。

2.检查蒸馏水的pH值。pH值应在6.0-7.0之间

3.使用足够大的容器。

4.检查玻璃器皿的pH值。



3.png


培养基变暗

1.培养基过度加热

2.培养基称重不正确,过量

3.不正确的pH值

4. 反复熔化

5.培养基过期或变质

1.不要过热。

2.不要加入过量的干粉。按照克/升复溶干粉。

3.检查蒸馏水的pH值,应为6.0-7.0

4.避免再熔和再制备培养基。

5.在有效期内使用培养基。



4.png


凝胶变软

1.琼脂没在溶液中,脱水培养基没完全复溶

2.琼脂发生酸水解

3.加入接种液导致琼脂稀释,而未能补足。

1.检查蒸馏水的pH值。 蒸馏水的pH应该介于6.0-7.0之间。

2.蒸馏水的酸性pH导致琼脂水解,溶解不完全。

3.严格按照规定的说明进行灭菌。避免过度灭菌,这可能导致凝胶变软。



5.png


菌落没有长出

因为培养基的原因:

1.培养基反复熔化

2.过度加热

3.不充分的混匀

4. 因成分稀释,而未能弥补其鉴别特性

5.培养基过期或变质

6.使用了不正确的配方

1.避免反复重熔。在给定时间内只复溶需要量的培养基。

2.不要过热。

3.确保适当的混匀。

4.使用适量的接种菌量。请勿在有效期过后使用菌液制备用培养基。

5.在有效期内使用培养基。

6.根据说明书使用规定量的培养基。


因为增补剂的原因:

1.增补剂过期或变质

2.增补剂未很好的复溶。所加浓度不够。增补剂添加不正确,如培养基过热或浓度有误。

3.增补剂未正确与培养基混匀。

1.在效期内使用增补剂。

2.根据说明书上的规定,使用规定量的增补剂,配置为规定浓度。

3.确保增补剂与培养基正确混匀。



6.png


培养基颜色变化(含指示剂的培养基)

培养基pH值在灭菌前后没有在规定的范围内

1.检查用于制备蒸馏水的水的pH值。蒸馏水pH值应在6.0-7.0之间。

2.在pH漂移的情况下,可使0.1N Cl/0.1N NaOH调节pH。


7.png


培养基有沉淀

通常发生在含无机盐的培养基

1.建议使用蒸馏水溶解干粉培养基。也可以使用纯净水。

2.推荐条件之外的培养基过热或过度灭菌,会导致沉淀。

3.这通常在含有磷酸盐的培养基上观察到。应该进行水的兼容性检查。



8.png


制备好的培养基储存时变暗

1.培养基含糖浓度高,并被持续加热

2.培养基存储温度高

1.不要过热

2.应按照推荐的时间和温度进行灭菌

3.避免持续地熔化

4.避免所配制的培养基长时间暴露于50°C以上的高温。


9.png


流体硫乙醇酸盐培养基中的环不匀称或环发生扭曲(M009)

1. 琼脂消化不当

2. 沸腾不足

1.高压前保证琼脂颗粒的完全消化,以避免出现相分离。

2. 正确消化、高压和冷却,不扰动培养基,才会形成密致环。


10.png


制备好的流体硫乙醇酸盐培养基(M009)有松弛环

配制好的培养基的扰动

再加热和冷却后,环可恢复原来的形状


11.png


在高压灭菌罐中,流体硫乙醇酸盐培养基有双环形成

因为氧气吸收

确保正确夹紧底部通气口。如果松动,吸收大气中的氧气会导致双环形成。