HiMedia培养基的质控流程

HiMedia提供种类繁多的培养基配方，包括标准培养基和客户定制的培养基。培养基以脱水形式提供，可用于不同领域：临床、食品、环境、化妆品、乳品、水、制药行业等。也包括各种药典指定的具有各种应用的培养基，如无菌检查，微生物限度检查等。

M1991I    CCA显色培养基

我们的质量保证

流程分为以下三类：

1.原料检查

2.半成品检查

3.成品检查

?原料

微生物培养基的设计，需要对每个成分进行统计学意义上的评估，并测量每个成分之间的相互作用。清楚这两点非常重要，HiMedia因此在生产前和生产过程中，采取了不同的质控检测措施。理想的终产品需要具有可预测的可重复的结果。

只有高品质的原料才用于生产HiMedia的产品。原料只从合格的供应商那里购买。每个原料会根据各国药典去分析它的级别、品质和纯度。对于没有具体规定的原料和化学品，我们有质量保证部门制订的自己的室内标准。

加入脱水培养基中的各种原料有：

1.蛋白胨、HiVegTM蛋白胨、HiCynthTM蛋白胨、肉提取粉B（相当于牛肉粉）作为氮源

2.碳水化合物作为碳源

3.矿物质（金属和无机盐）

4.选择因子

5.维生素

6.染料和pH指示剂

7.凝固剂

1.蛋白胨（肉、酪蛋白、大豆、明胶、酵母）、HiVegTM蛋白胨和HiCynthTM蛋白胨

蛋白质水解的降解产物俗称蛋白胨，是多肽，寡肽，氨基酸，有机氮碱，盐和微量元素的的混合物。生产出的各种蛋白胨反映了微生物对氨基酸和多肽的不同需求。蛋白质（酪蛋白，肉或大豆）来源和水解类型不同（如酶解或酸水解，酶解包括胰蛋白酶、胃蛋白酶或木瓜蛋白酶），其蛋白胨也存在着变化。HiCynthTM蛋白胨是化学成分确定的蛋白胨，其提供的氮源营养与其他动物或植物蛋白胨等同。

图. 采用不同蛋白胨培养的E.coli生长曲线

除了HiMedia自己的标准，蛋白胨还依据美国药典关于“动物组织的酶解”以及相似的“酪蛋白的胰蛋白酶水解”标准进行分析。

2. 碳水化合物

一些微生物能利用的碳水化合物（糖）种类非常广泛，而其他微生物对糖的选择更为挑剔，后者更通过糖发酵能力进行鉴定。大量培养基配方包含特定的糖和指示剂，以用于检测特定的酶反应和用于诊断。

培养基中的糖会被检测，以保证其化学身份和纯度。

糖对于微生物的支持生长也会通过固体培养基或液体培养基进行检测，并与标准品比对。在固体培养基中，菌落的特征也会被检查。

MV378   动力学吲哚鸟氨酸HiVeg培养基

1.对照

2.大肠埃希菌（ATCC 25922）

3.肺炎克雷伯菌（ATCC 13883）

4.奇异变形杆菌（ATCC 25933）

M689   Moeller脱羧酶肉汤（含盐酸精氨酸）

1.对照

2.弗氏肠杆菌（ATCC 8090）

3.产气肠杆菌（ATCC 13048）

4.大肠埃希菌(ATCC 25922）

5 肺炎克雷伯菌（ATCC 13883）

6.普通变形杆菌（ATCC 13315）

7.铜绿假单胞菌（ATCC 9027）

8.伤寒沙门氏菌(ATCC 6539）

9.福氏志贺氏菌（ATCC 12022）

3. 矿物质和化学品

所有生命体的生长和代谢都需要一些无机盐。大多数细菌可通过培养基中添加

钠、钾、镁、锰、二价铁或三价铁离子（以氯盐、磷酸盐、硫酸盐形式）得到满足。

4.选择因子（胆盐或牛胆汁）

胆盐具有选择性，用于鉴别那些能在肠道环境中生存的细菌，而不能生存的细菌。根据细菌对胆盐的耐受性，在培养基中可升高胆盐或胆盐衍生物的浓度。

胆盐的化学分析流程和标准是依据各国药典关于脱氧胆酸钠、胆酸钠和牛磺胆酸钠。当胆盐加入培养基时，它不应影响指示剂的颜色或随后的颜色变化。它不应在培养基储存后在表面形成泡沫或形成沉积。胆汁进一步的功能测试是通过标准胆盐作为对照。而且，细菌的回收试验是采用E.coli作为测试菌株之一，而胆盐的已知性能作为对照。采用不同胆盐制备的固体培养基是通过Miles-Misra方法进行测试。每种培养基关于不同肠杆菌科成员的生长回收率进行了记录。

5. 染料和pH值指示剂

添加到培养基中的染料也可用作选择剂或pH指示剂或者Eh指示剂。当用作选择剂时，染料和配方中的其他成分之间可能发生相互作用。因此，同样的煌绿样品在不同的蛋白胨溶液中，对大肠杆菌可能会显示出不同的抑制效果。胆盐和煌绿相互作用，会减少染料的毒性，因此通过胆汁盐培养基的染料加入，可以确定这些染料的毒性水平。苯胺染料在完全氧化时毒性更大，因此它在蛋白胨或胰蛋白胨里灭菌时，发生染料的还原，从而导致毒性变化是可能的。如果培养基中使用的琼脂矿物质含量高，与培养基成分不相容的情况可能就会发生。

因此，我们按照H.J. Conn撰写的标准（注：2002年出版的Conn's Biological Stains,第10版）去分析我们培养基中使用的染料。除了确定染料的化学纯度外，还开展微生物适应性检查。这些通过各种“测试用微生物”去检测，并与标准染料比较。

6. 凝固剂

琼脂在培养基中的最初作用是形成凝胶。琼脂的透明度非常重要。理想状况是琼脂溶液是透明的，没有任何雾状或沉淀。雾状是因为矿物质的不相容或过滤后还有残渣。琼脂的另一个特点是它允许化合物扩散，同时将水固定在刚性凝胶中。这个属性被用于某些维生素和抗生素的微生物法测定，如药敏试验的扩散法，而维生素则产生出成比例的生长带。

在琼脂用于细菌学方面时，它的化学不纯成分也进行了分析。

除了以上检测，还检测了琼脂的毒性，以观察是否存在毒性或抑制物质。方法是让苛养型微生物在培养基上生长，其生长状况、菌落大小、菌落形状、色素等，和已知的标准琼脂进行比较。

7.维生素

维生素和化学品是根据美国药典和美国Food Chemical Codex进行分析的。主要分析化学纯度和其他参数。它们的效力则通过AOAC（美国分析化学家协会）的微生物方法进行验证。

8.显色底物

HiCrome的显色培养基中都含有显色底物，并且通常是2种显色原的混合物。显色原作为底物，被生长菌的特异酶裂解，菌落产生不同颜色而可鉴别。例如，X-葡萄糖酸苷被E.coli的葡萄糖醛酸酶裂解，产生葡萄糖醛酸，并将蓝绿色带给菌落。

M1575

HiCrome EC 0157:H7选择性琼脂基础

E. coli 0157:H7菌落

?半成品

一个样本批次通过已测试并通过的组分制备，并和以前已通过批准的完全培养基批次进行并排分析。在确保所有参数如颜色、透明度、pH值、可溶性、成胶性和培养特征，以及保证培养基组分的相容性后，该批次可用于大规模的生产。

在生产中，每个环节会小心遵循GMP标准。中间阶段，会取样并送至质控实验室，根据HiMedia自己的规定，进行微生物评价和纯度分析。

半成品批次在可控条件下（如温度、湿度等）连续记录。生产过程采用不锈钢设备或玻璃设备，避免产品被有毒金属污染。

?成品

每个HiMedia产品都有确定的产品参数，它们包括合格产品的标准和成品批次的发布。成品需符合以下标准：

而且，我们建立了独特的室内标准，将批间差异（因生物材料的相互影响）降低到0。

?可追溯性

作为一个ISO/CE认证的公司，可追溯性是一个重要的质量系统建立的标准。每个原料和每次生产过程都有细心的记录。合格的成品样品和生产过程中的各种记录都有存档，便于未来参考。

?验证

如果用户将该培养基用于说明书、技术文件和COA上所列的用途之外，而又不及时分享这样的意图，这将消除我们在此事上的责任。建议客户在自己的实验室进行验证和测试。HiMedia是您值得信赖的合作伙伴，在与培养基相关的验证过程中给予帮助。

M1297AR 念珠菌鉴别琼脂

?稳定性研究

有代表性的批次可开展稳定性研究，以确定新产品的保质期，以及验证库存产品的效力。6个月后，代表的批次会再次测试，以和参考产品比较，从而验证产品的稳定性。

M1651   芽孢杆菌显色培养基

?分析证书

发布的每一批次都有详细的分析证书，上面有产品的合格标准和测试结果。分析证书的纸质拷贝可索引获得，或直接从我们网站下载（www.himedialabs.com）