肠杆菌科的检测和鉴定

在食品和饲料的初级生产阶段，以及食品车间环境中，常需检查肠杆菌科细菌的存在和计数。在《ISO 21528-1：2017 食品和动物饲料的微生物学 肠杆菌科检测和计数的水平法》中，可以看到该标准关于肠杆菌科的检测方法的推荐。

ISO 21528-1：2017取代的是ISO 21528-1:2004，主要是做的方法上的调整，如原先是用缓冲蛋白胨水（BPW）预增菌，再用EE肉汤增菌，现在则改用

BPW直接增菌；验证试验是用葡萄糖OF培养基，而非葡萄糖琼脂。该ISO适合两种情况，一是微生物需要通过增菌来复苏，二是预期微生物数量小于100/ml（g）样品。

其大致流程如下：首先将样品在BPW孵育37℃，18h，再在VRBG培养基上接种，37℃孵育24h±2h，观察典型菌落（粉红色菌落）。再选择可疑菌落，接种至非选择性培养基如营养琼脂平板上进行纯培养，37℃孵育24h±2h。然后挑取一个菌落进行氧化酶试验。如为阴性。则对该菌落再进行葡萄糖发酵试验。葡萄糖发酵试验采用的是葡萄糖OF培养基，37℃孵育24h±2h后，如果试管液体变为黄色，则为阳性反应。

这是即可汇报检测结果了。如果不想做上述2种验证试验，而且需要进一步对肠杆菌科鉴定到种，则可采用HiMedia公司生产的生化鉴定卡。HiMedia公司至少有2种肠杆菌科生化鉴定卡，一种货号是KB003品名为Hi25? Enterobacteriaceae Identification Kit。另一种货号是KB016，品名为Hi24? Enterobacteriaceae Identification Kit。 KB003包含25项检查（含13种传统生化试验和含葡萄糖在内的11种糖发酵试验和1个氧化酶试剂纸片），可鉴定68种肠杆菌。KB016包含24种生化类型，可鉴定65种肠杆菌。KB016和KB003相比，有15种生化反应二者重合：

ONPG试验、赖氨酸脱羧试验、鸟氨酸脱羧试验、尿素酶试验、苯丙氨酸脱氨试验、伏普试验、甲基红试验、吲哚试验、七叶苷水解试验、纤维二糖发酵试验、蜜二糖发酵试验、蔗糖发酵试验、海藻糖发酵试验、葡萄糖发酵试验、乳糖发酵试验、

KB003独有的生化反应包括：

硝酸盐还原试验、H2S产生试验、柠檬酸利用试验、丙二酸利用试验、阿拉伯糖发酵试验、木糖发酵试验、核糖醇发酵试验、鼠李糖发酵试验、棉子糖发酵试验、氧化酶纸片试验。

KB016独有的生化类型包括：

吡咯烷酮酶试验、β-葡萄糖醛酸酶试验、α-半乳糖苷酶试验、β-木糖酶试验、山梨醇发酵试验、水杨苷发酵试验、甘露糖发酵试验、麦芽糖发酵试验、

在实际肠杆菌科成员的鉴定中，客户可选择使用。

HiMedia公司是国际知名微生物产品生产商，一直致力于微生物培养和鉴别鉴定产品的研发和生产，具有WHO GMP认证、ISO9001：2008，ISO13485：2003认证，CE认证和FDA注册登记。其产品行销全球140多个国家。

缔一生物作为HiMedia公司在中国的代理商，在微生物培养和检测领域，一如既往地为您带来优质的服务。如需详细了解，可访问公司官网：

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