HPV DNA 检测新方法：以致癌基因E6/E7作靶点，避免漏检

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　　宫颈癌简介

　　宫颈癌是女人最多见的恶性肿瘤，其死亡率仅次于乳腺癌。这些年，宫颈癌的发展趋势逐渐倾向年轻化且呈逐年上升景象。人乳头瘤病毒（ HPV）传染与宫颈癌有高度相关性，是宫颈癌的首要致病首恶，研讨标明99.7% 的宫颈癌病人存在HPV传染。因而，宫颈癌筛查至关重要。宫颈癌筛查项目中，临床上以HPV检测和TCT查看较为多见。

　　HPV基因组介绍

　　HPV是一种双链的小DNA病毒，具有7900个碱基对，由病毒蛋白外壳和中心DNA物质构成，无包膜。病毒基因组分为3个有些：前期基因区（E）、晚期基因区（L）及将前期区与晚期区分隔的长调控区（LCR）。调控区首要调控病毒的转录，操控病毒蛋白和传染颗粒的发生。前期区编码E6、E7、E1、E2、E4和E5蛋白质，首要参加病毒DNA的仿制、转录。晚期区编码L1、L2蛋白质，分别是病毒的首要和非必须衣壳蛋白[1]。

　　E6、E7基因的致癌机理

　　前期区（E区）编码蛋白基因中，由E6、E7基因编码的致癌蛋白是致使宫颈上皮癌变的主要因子，编码的致癌蛋白是致使宫颈上皮癌变的主要因子，这两种蛋白与细胞内两种主要抑癌蛋白p53和pRb的联系以及调控可以显着改动细胞生长周期和DNA修正，由此致使的基因组不稳定性是细胞转化和永生化的必要条件，见下图[2]。

　　在CIN I期及之前，HPV主要以游离状态存在于宿主细胞中，在病变进一步开展的过程中，HPV基因组会结合到宿主细胞基因组，跟着病变程度的添加，HPV最终以结合状态存在。结合以后，L1基因常常丢掉，而E6/E7基因继续存在。

　　L1 与E6/E7分别作为检测靶点的区别

　　从低级别病变发展为癌的过程中，HPV基因组会发生整合。在整合过程中，E6/E7基因持续存在，L1基因可能会丢失，有漏检风险。

　　· 对56个浸润性宫颈癌组织活检样本分别用L1区通用引物和E6-E7分型引物进行检测比较发现，有23个样本存在L1区缺失[3]。

　　· 研究发现，HPV 18的L1/E1区更容易丢失。几乎所有的HPV18阳性的宫颈癌中病毒基因组整合到人基因组上；而HPV16阳性的宫颈癌中也有≤60%的病毒基因组发生整合[4]。

　　· 一项基于15,774例病人样本的研究发现，跟型别特异性E6/E7引物PCR比较，通用引物MY09/11 PCR检测会造成10.9%（522例）的漏检；409例由MY09/11 PCR检测结果为阴性的病人中，随访发现最终有104人（25.4%）发展为CIN2+[5]。

　　相对于以L1基因作靶点，以E6/E7基因作检测靶点，可以避免由于HPV基因组整合到人基因上造成的漏检。因此，致癌基因E6/E7更适合作为HPV DNA检测的靶点。

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　　[1] 胡家昌。 高危型HPVDNA与宿主基因整合及致癌机理的相关研究进展。 现代妇产科进展， 2015, 24（5）：384-386

　　[2] CB Woodman, SI Collins, LS Young The natural history of cervical HPV infection: Unresolved issues. Nature Reviews Cancer,?2007,?7（1）：11

　　[3] F Karlsen, M Kalantari, A Jenkins, E Pettersen, G Kristensen Use of Multiple PCR Primer Sets for Optimal Detection of Human Papillomavirus. Journal of Clinical Microbiology, 1996, 34（9）：2095-2100

　　[4] Human papillomavirus is a necessary cause of invasive cervical cancer worldwide. Journal of Pathology, 1999, 189（1）：12

　　[5] Comparison of MY09/11 consensus PCR and type-specific PCRs in the detection of oncogenic HPV types. Journal of Cellular & Molecular Medicine,?2007,?11（4）：881-891

　　文章整合自生物谷