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礦泉水中產(chǎn)氣莢膜梭菌的檢測(cè)

2019-07-01 14:37來(lái)源：威正翔禹|締一生物


產(chǎn)氣莢膜梭菌為厭氧型革蘭氏陽(yáng)性產(chǎn)芽孢的桿狀菌，廣泛分布于環(huán)境，在人的腸道內(nèi)也有發(fā)現(xiàn)。在自然界的大量水體中，產(chǎn)氣莢膜梭菌也存在，產(chǎn)生芽孢，并對(duì)污水處理措施和極端溫度具有抵抗力。產(chǎn)氣莢膜梭菌數(shù)量與水污染程度有一定的相關(guān)關(guān)系，因而也被認(rèn)定是反映水質(zhì)的一種指示菌。我國(guó)《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 飲用天然礦泉水檢驗(yàn)方法》GB8538—2016規(guī)定，天然礦泉水產(chǎn)品和水源水需檢測(cè)產(chǎn)氣莢膜梭菌。在該國(guó)標(biāo)中，指定的分離培養(yǎng)基為亞硫酸鹽-多粘菌素-磺胺嘧啶瓊脂（簡(jiǎn)稱SPS），但早有文獻(xiàn)報(bào)道，用該培養(yǎng)基經(jīng)24h厭氧培養(yǎng)后產(chǎn)氣莢膜梭菌的黑色菌落產(chǎn)生不明顯，容易產(chǎn)生漏檢1。


國(guó)際上推薦的還有一款分離培養(yǎng)基為M-CP培養(yǎng)基。M-CP培養(yǎng)基最初是由Bisson 和Cabelli兩個(gè)微生物學(xué)家描述的，用于快速鑒定海水、飲用水和污水中的產(chǎn)氣莢膜梭菌2。它被歐洲理事會(huì)指令98/83/EC中推薦用于人飲用水的水質(zhì)檢測(cè)，方法為膜過(guò)濾法3。


HiMedia生產(chǎn)的一款梭菌選擇性顯色培養(yǎng)基（貨號(hào)M1354）即M-CP培養(yǎng)基。M是膜過(guò)濾法的英文**個(gè)字母，CP是產(chǎn)氣莢膜梭菌的英文簡(jiǎn)稱。它用于水質(zhì)微生物檢測(cè)中，產(chǎn)氣莢膜梭菌的快速分離和初步鑒定。該培養(yǎng)基對(duì)于產(chǎn)氣莢膜梭菌具有更好的回收率，可用于監(jiān)測(cè)各種類型的水體，包括氯消毒過(guò)的水、工業(yè)廢水等。


培養(yǎng)基中的L-鹽酸半胱氨酸為還原劑，溴甲酚紫為pH指示劑。培養(yǎng)基中的吲哚β-D-葡萄糖苷為顯色底物，而二磷酸酚酞用于檢測(cè)酸性磷酸化酶。添加的D-環(huán)絲氨酸和多粘菌素B（FD153）抑制伴隨的其他菌群。用該培養(yǎng)基厭氧培養(yǎng)44 ± 1°C，21 ± 3小時(shí)即可觀察結(jié)果。當(dāng)黃色菌落在暴露于氨煙30秒后變?yōu)槊倒寮t時(shí)，即可認(rèn)為是產(chǎn)氣莢膜梭菌。還可挑取典型菌落和非典型菌落（綠色或未變色菌落）進(jìn)行進(jìn)一步的驗(yàn)證。




M-CP培養(yǎng)基中所用的顯色劑吲哚β-D-葡萄糖苷濃度后來(lái)進(jìn)行調(diào)整，濃度降低為60mg/L而不影響其靈敏度 4，這使得整個(gè)培養(yǎng)基的價(jià)格下降，因而能普遍使用。


HiMedia公司是國(guó)際知名微生物產(chǎn)品生產(chǎn)商，一直致力于微生物培養(yǎng)基和細(xì)胞培養(yǎng)基的研發(fā)和生產(chǎn)，具有WHO GMP認(rèn)證、ISO9001：2008，ISO13485：2003認(rèn)證，CE認(rèn)證和FDA注冊(cè)登記，尤其通過(guò)CE的體外診斷注冊(cè)。其產(chǎn)品行銷全球140多個(gè)國(guó)家。


締一生物作為HiMedia公司在中國(guó)的代理商，在微生物培養(yǎng)和檢測(cè)領(lǐng)域，一如既往地為您帶來(lái)優(yōu)質(zhì)的服務(wù)。如需詳細(xì)了解，可訪問(wèn)公司官網(wǎng)：

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參考文獻(xiàn)


1. 潘寶怡，等. 飲用天然礦泉水中產(chǎn)氣莢膜梭菌檢測(cè)國(guó)標(biāo)方法的改進(jìn). 現(xiàn)代食品科技.2012,28(9):1236



2. Bisson, J.W., and Cabelli, V.J., 1979, Membrane filter enumeration method for Clostridium perfringens: Applied and Environmental Microbiology, v. 37. ****. p. 55-66


3. E.U. (1998) 98/83/EC of Council of 3rd of November 1998 on the quality of water intended for human consumption. Off. J. Eur. Commun., L330, 32-54


4. Armon, R., and Payment, P., 1988, A modified m-CP medium for enumerating Clostridium perfringens from water samples: Canadian Journal of Microbiology, v.34. p.78-79.