只用一招，简单祛除细胞上的支原体!

细胞培养最怕支原体污染，但有一些被污染的细胞不能被丢弃时该怎么办？今天小编把国际上惯用的一个小绝招教给你，简单有效！

如何祛除细胞上的支原体污染？

据研究表明，约98％的支原体存在于细胞表面和细胞间隙。支原体直径约180~350nm，比细胞小很多，经低速离心与细胞分离。通过反复悬浮冲洗、离心，加上使用我们的Zell Shield?，即可在细胞培养四代以内有效地祛除支原体。

什么是Zell Shield?？

Zell Shield?是一种链青霉素类复合抗生素，

对细胞影响很小，可以有效抑制细胞培养中的

支原体、细菌、霉菌、真菌等微生物增殖。

普通的链霉素、青霉素对支原体没有效果。

那为什么Zell Shield?有效呢？

因为Zell Shield?是由Minerva公司生产的专门针对支原体的抗生素。

德国Minerva公司是由全球**的罗伯特·科赫研究所中分离出来的，专注于支原体、细菌的污染控制，尤其以支原体和军团菌的祛除、检测而闻名。Zell Shield?是Minerva公司的一项**产品，不但对细胞培养中的细菌、真菌、霉菌有效，更是对支原体的祛除有确切效果。

具体是怎么操作呢？

1.首先把被支原体污染的细胞消化下来，

放入离心管离心，弃上清。

再加入干净的PBS悬浮冲洗细胞、

低速离心（300~500r/min）、弃上清，

反复三次。

这样可祛除细胞表面60％~70％的支原体，

支原体还剩约30％~40％.

2.细胞加入含1％Zell Shield?的新鲜培养基，

传代培养。

这时因培养基中Zell Shield?的抑制作用

细胞培养过程中，

虽然细胞增殖，但残留的支原体无法增殖。

细胞需再次传代时，把第二代细胞消化下来，

离心，弃上清。

加入新鲜PBS悬浮冲洗、再离心、弃上清，

反复三次，

这时，细胞上残留的支原体大约已剩余为最初污染量的10％左右。

3.细胞加入含1％Zell Shield?的新鲜培养基，

传代培养。

需再次传代时把第三代细胞消化下来，

离心，弃上清。

加入新鲜PBS悬浮冲洗、再离心、弃上清，

反复三次，

可再次祛除60％~70％的残余支原体，

通过冲洗、抑制、换液等操作，

细胞中支原体的残留污染量大约只剩3％左右。

4.细胞加入含1％Zell Shield?的新鲜培养基，

传代培养。

需再次传代时把第四代细胞消化下来，

离心，弃上清。

加入新鲜PBS悬浮冲洗、再离心、弃上清，

反复三次，

可再次祛除60％~70％的支原体，

此时，支原体残留量大约已低于1％.

支原体的增殖亦有密度要求，

用Zell Shield?处理过四代的细胞，

即便撤掉Zell Shield?，

只要保证没有新的支原体人为再次带入，

原有支原体也无法再增殖，

随着传代，换液，支原体的老化、死亡，

细胞中的支原体污染基本就彻底解决了。

敲黑板，划重点啦

1.每次传代时，重复三次对细胞悬浮冲洗步骤非常重要，操作要正确、规范，以达**效果！

2.在培养基中加入1％Zell Shield?抑制支原体增殖！

3.使用安全的血清、培养基等试剂，不再有新的支原体加入！

做到以上三点即可确保祛除支原体污染。

Zell Shield?工作原理是什么？

支原体祛除剂Zell Shield?（培养基用）

是一种即用型链青霉素类的复合抗生素，

在培养基中1%的浓度

通过阻止原核生物DNA及蛋白的合成，

抑制细胞培养中遇到的

细菌、真菌、霉菌增殖，

更可以有效、精确地抑制支原体增殖，

且对细胞基本安全。

品名：支原体祛除剂Zell Shield?（培养基用）

生产商：Minerva Biolabs GmbH

生产地：德国

货号：13-0050

规格：50mL/瓶

储存温度：-18℃

使用注意事项：实验室初次使用，注意分装，分装后的小包装Zell Shield?仍-20℃避光冷冻保存，现配现用。

市场价格：电话询价

货期：大多数时间国内有现货

订货热线：400-166-8600

咨询QQ ：1580434811

官方网址：www.cdhmbw.com

产品引用文献：

（1）BennettT.A. et   al.,(2014).Pharmacological profiles of acute myeloid leukemia treatments in patient samples by automated flow cytometry:   a bridgeto individualized medicine.Clinical   Lymphoma,   Myeloma   & Leukemia, 14(4):305-18. doi: 10.1016/j.clml.2013.11.006.

（2）Cagno V. et   al., (2017).In   vitro anti-herpes   simplex   virus-2   activity   of Salvia   desoleana Atzei   &   V.   Picci essential oil. PLoS One,12(2):e0172322. doi: 10.1371/journal.pone.0172322.

（3）Carnesecchi J. et   al., (2015).Estrogens   Induce   Rapid   Cytoskeleton   Re-Organization   in   Human   Dermal Fibroblasts     via     the     Non-Classical     Receptor     GPR30. PLoS     One,10(3):e0120672. doi: 10.1371/journal.pone.0120672.