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胎牛血清質(zhì)檢過程中的病毒檢查

2020-04-16 11:35來源：威正翔禹|締一生物

胎牛血清作為天然培養(yǎng)基被實驗室和科研單位廣泛使用，它富含細(xì)胞生長中的各種營養(yǎng)成分，但是也容易受到來自母牛自身存在的病毒感染例如瘋牛病的影響，從而給細(xì)胞培養(yǎng)帶來潛在的干擾。

12.jpg

在美國，胎牛血清的病毒檢查遵循著9 CFR 113.52 、9 CFR 113.53聯(lián)邦法令，并以獸藥委員會（CVMP）關(guān)于免疫性獸藥生產(chǎn)中應(yīng)用牛血清的指南文件（EMEA/CVMP/743/00-Rev.2）、**藥委員會（CPMP）關(guān)于生物藥生產(chǎn)中牛血清應(yīng)用指南的文件（EMEA/CPMP/BWP/1793/02）為參考，并在美國藥典（USP）中有所描述。而我國在藥典中目前只有有關(guān)新生牛血清的質(zhì)檢規(guī)定，還沒有胎牛血清的內(nèi)容。


在USP提到病毒檢查中，建議使用兩種或兩種以上的細(xì)胞系作為檢測細(xì)胞，其中一種細(xì)胞系應(yīng)為牛源。檢測時，添加15%的待測牛血清培養(yǎng)細(xì)胞至少21天，期間細(xì)胞至少傳代兩次。之后觀察是否存在病毒的擴(kuò)增。如用顯微鏡觀察是否存在細(xì)胞病變效應(yīng)（例如由牛鼻支氣管炎病毒導(dǎo)致）、細(xì)胞染色和鏡下包涵體檢查、血吸附檢查（(牛副流感3型病毒），并在此基礎(chǔ)上進(jìn)行針對如下病毒的特異性的免疫熒光抗體檢查：


?牛病毒性腹瀉病毒（BVDV）

?牛細(xì)小病毒

?牛腺病毒

?牛蘭舌病毒

?牛呼吸道合胞病毒

?呼腸弧病毒

?狂犬病病毒


在其他牛血清的應(yīng)用中，可能還需要檢測一些其他的病毒。如：

牛赤羽病，牛皰疹病毒1（BHV-1）、副流感-3病毒（PI-3）、牛白血病、牛輪狀病毒、牛圓環(huán)病毒、牛多瘤病毒、冠狀病毒、牛環(huán)曲病毒、牛腸道病毒、牛星狀病毒、口蹄疫病毒（FMDV）、牛瘟病毒。

總之，確定牛血清沒有病毒感染，無論對于細(xì)胞培養(yǎng)，還是疫苗生產(chǎn)，都具有非常重要的意義。