中国药典可能面临修改：关于生物制品中的支原体检测

　　2017年6月28日 威正翔禹生物viansaga导读：中国药典可能面临修改：关于生物制品中的支原体检测

　　小编今日看到一篇文章，是《中国生物制品学杂志》2015年8月第28卷第8期上的《中国生产用细胞基质污染支原体类型的分析及猪鼻支原体特异性检测方法的初步建立》，大吃一惊，《中国药典》2015年检测生物制品中的支原体所用的方法，可能要面临修改，因为用培养基分离培养来检测支原体的方法，对某些支原体，可能根本测不出来！

　　这篇文章的两个作者都是来自中国食品药品检定研究院。文章作者提到：“用于生物制品生产的细胞基质或治疗性细胞产品被支原体污染后，支原体或支原体代谢产物可进入人体，并对人体产生严重危害。因此，对支原体污染的有效检测是确保细胞基质及治疗性细胞产品质量的前提”。

　　又“据估计，世界范围内约15%～50%的保藏细胞受支原体污染。据中国医学科学院细胞中心统计，其2001-2004 年间检测的不同来源细胞支原体污染率高达约60%。引起体外细胞污染的支原体主要有口腔支原体、发酵支原体、猪鼻支原体、莱氏无胆甾原体等。”“体外培养细胞支原体传统检测方法为培养法和指示细胞染色法，这两种方法是目前世界药品监督管理机构或组织普遍认可的检定方法，即”药典方法“。但其缺点是耗时长，灵敏度低，这也是目前体外培养细胞支原体污染检出率高低差异较大（5%-87%）的主要原因”。

　　作者对中国食品药品检定研究院细胞资源保藏及研究中心收集的70份细胞基质培养上清进行了检测。这70份样品已通过培养法及染色法证实存在了支原体污染。这回作者发现其中49份为猪鼻支原体污染。该报道**揭示了猪鼻支原体是导致我国生物制品生产用细胞基质污染最常见的支原体类型。

　　但“猪鼻支原体对生长培养基的营养要求较为苛刻，需要寄生在培养细胞上摄取胆固醇和发酵葡萄糖，而目前《中国药典》三部（2010 版）支原体培养法要求使用的支原体肉汤培养基及精氨酸支原体肉汤培养基中均不含上述两种营养物质。因此，理论上培养法无法检测出猪鼻支原体污染，仅能通过指示细胞感染及染色法进行检测，但该方法操作繁琐，实验过程中的指示细胞状态和细胞固定及染色的质量均会对检测结果的判定产生影响，更重要的是该方法缺乏特异性。”

　　因此，大力发展或采用PCR的方法进行生物制品中支原体污染的检测势在必行。欢迎采用德国Minerva公司（研究人员来自德国罗伯特·科赫微生物研究所）研制的VenorGeM支原体检测试剂盒，广谱、特异，灵敏度高。该系列试剂盒共有四种，其中经典法和荧光定量法已早被欧洲药典批准，可放心使用。