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支原体为什么能吸附在细胞表面

2021-01-29 09:28来源:威正翔禹|缔一生物


什么是支原体?

支原体是大小在0.1~0.3μm的一种原核单细胞生物。由于没有细胞壁,它具有多形性,可表现为杆状、丝状、球状等多种形状。它容易吸附在真核细胞表面,和真核细胞交换物质成分,引发细胞应激状态,干扰正?;虮泶铩?/span>

由于支原体是细胞培养过程中常见的干扰物,我们应当对它了解更多,以利于更好地祛除支原体污染。


支原体感染细胞并进行寄生,以获得必要的营养,**步是对细胞的吸附。那么支原体为什么会吸附在细胞膜上呢?


原来支原体表面的确存在一些粘附细胞器,参与对细胞的吸附。由于支原体物种有150多种,其粘附机制可能各不相同。下面以肺炎支原体为例,简要列举其中的几种粘附分子(其中有的是细胞骨架蛋白):

P1蛋白

P30蛋白

P65蛋白

HMW1蛋白

HMW2蛋白

HMW3蛋白


这些粘附蛋白的具体位置如下图所示。


图片来自:Krause DC and Balish MF, 2004. Cellular engineering in a minimal microbe: structure and assembly of the terminal organelle of Mycoplasma pneumoniae. Mol. Microbiol. 51(4):917-924.


支原体的粘附细胞器是一种极性结构,它可使支原体与宿主细胞结合,并参与支原体的分裂以及滑行运动。

那么,这种粘附细胞器的受体主要是宿主细胞的什么分子呢?主要是唾液酸糖蛋白。红细胞表面富含这种蛋白,因此支原体常表现为血吸附阳性。


由于支原体容易吸附在宿主细胞表面,因此当存在支原体污染时,如果细胞不愿意丢弃(如已转染,已体外刺激或已费力扩增的细胞),希望继续培养,这时可使用德国MB的支原体祛除剂Zell Shield?,采用下面的“悬浮冲洗法”进行支原体的祛除。

一、产品信息


中文品名:支原体祛除剂(培养基用)

英文品名:Zell Shield?

厂家:德国Minerva Biolabs公司

货号:13-0050

规格:50ml/瓶

用途:预防和祛除细胞培养中的支原体


二、产品特点


1) 高效广谱

Zell Shield?不仅对抑制支原体有效,也对抑制霉菌、酵母、细菌有效。因此加入Zell Shield?后,无须再加其他抗生素(如青/链霉素、制霉菌素、两性霉素B)。

2) 安全

无细胞毒性,同时适用于细胞系和原代细胞。Zell Shield?对内毒素检查无干扰,也不影响质粒转染或病毒包被。

3) 活性稳定

在细胞培养期间,Zell Shield?始终保持稳定的活性。

4) 使用方便

Zell Shield?为即用型100×溶液,可直接加入培养基使用,终浓度为1%即可。


三、悬浮冲洗法 + Zell Shield?祛除支原体污染


据研究表明,约98%的支原体存在于细胞表面和细胞间隙。支原体比细胞小很多,经低速离心可与细胞分离。通过反复悬浮冲洗细胞、离心,加上使用Zell Shield?,即可在细胞培养四代以内有效地祛除支原体。

具体流程如下图:

希望以上信息能给你带来帮助。