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动物源培养基Yes or Not?

2022-07-28 15:35来源:缔一生物

引言

图片


多数情况下,动物细胞的体外培养均依赖动物血清而生长,脱离血清,细胞将无法生长。目前,使用较多的是各类牛血清,例如:胎牛血清、新生牛血清、小牛血清、成牛血清等,也有一些细胞培养会用到马血清。


但也有研究人员认为,细胞培养基中的牛血清,可能存在一定外源异种物质污染的风险,临床中使用的生物制品中如果有牛血清的残留,还有可能会引起过敏等反应。


于是无动物源成分培养基(Serum-Free Media)便应运而生。其中添加了血清中所含有的已知成分:粘附因子、生长因子、必需的营养物质和激素等,还有一些蛋白来源于重组蛋白或者蛋白水解物。能在一定程度上模拟血清的功能,帮助细胞生长。但无血清培养基中所能添加的因子有限,不能100%还原血清成分,因此对于细胞的保护和支持都不如含有血清的培养基。


那么在细胞培养过程中,含动物源成分培养基与无动物源性培养基到底该如何选择?本期内容,就来盘点这二者的优缺点,希望对小伙伴们选择培养基或是血清提供帮助。


文章篇幅较长,目录已经搭好,供大家预览!


★ 目录 ★

含动物源成分培养基

无动物源成分培养基

动物源VS非动物源该如何选择?


一、含动物源成分培养基

1、典型代表:血清

这里以血清为典型动物源成分为代表。

血清的本质是血液或血浆经过凝血处理(血小板激活)后,再经过滤等处理所得到的上清液。有学者认为,血清中含有血小板激活后释放的各种生长因子,因此可以支持多种细胞生长。

2、含血清培养基优势

(1)含动物源成分,如血清,提供基本营养物质:氨基酸、维生素、无机物、脂类物质、核酸衍生物等,是细胞生长必需的物质。

(2)提供激素和各种生长因子:胰岛素、肾上腺皮质激素(氢化可的松、地塞米松)、类固醇激素(雌二醇、睾酮、孕酮)等。生长因子如成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、血小板生长因子等。

(3)提供结合蛋白:结合蛋白作用是携带重要的低分子量物质,如白蛋白携带维生素、脂肪、以及激素等,转铁蛋白携带铁。结合蛋白在细胞代谢过程中起重要作用。

(4)提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤。

(5)对培养中的细胞起到某些保护作用:有一些细胞,如内皮细胞、骨髓样细胞可以释放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。这种作用是偶然发现的,现在则有目的的使用血清来终止胰蛋白酶的消化作用。因为胰蛋白酶已经被广泛用于贴壁细胞的消化传代。血清蛋白形成了血清的粘度,可以保护细胞免受机械损伤,特别是在悬浮培养搅拌时,粘度起到重要作用。血清还含有一些微量元素和离子,他们在代谢解毒中起重要作用,如硒等。


3、含动物源成分培养基不足

人用或兽用药物生产过程中,血清中不明成分,作为异源物质,可能会引起人或动物的免疫/排异反应。

二、无动物源成分培养基

1、无动物源成分培养基

基于生产药物的安全考虑,培养基中的添加组分无动物来源,需要的蛋白来源于重组蛋白或者蛋白水解物,这些组分可以保障细胞生长及增殖的需要后来又衍生出完全不用动物来源的蛋白(但有来自于植物蛋白的水解片段,或合成多肽片段等其他衍生物等部分添加物)的培养基。

2、无动物源成分培养基优势

避免所生产的药物,因动物源成分而产生的毒性。

3、无动物源成分培养基不足

(1)无法为细胞提供保护作用:细胞在无血清培养基中易受某些机械因素和化学因素的影响。

(2)部分产品成本较高,保存条件要求严格。

(3)具有高度特异性:一种无血清培养基仅适合某一类细胞的培养。处于发育的不同分化阶段的细胞(例如干细胞与定向前体细胞相比)需要不同的配方,对生长因子和细胞因子的选择尤为重要。

(4)容错性较差:而且在去除血清的同时,也去除了一些血清蛋白具有的保护、解毒作用,因此对试剂、水的纯度和仪器清洁度的要求更高。

(5)种类繁多,具有高度特异性:每一种类型的细胞都需要一种培养基配方。

(6)细胞增殖影响:通常在无血清培养基中细胞生长缓慢,有限细胞系的传代次数也减少。

动物源VS非动物源

如何选择?


含动物源成分培养与不含动物源成分培养基,各有优缺点,如何选择还是应该根据实验需求、使用场景来定。


某些特定的工业生产会更青睐无血清培养基(工业生产用的无血清培养基可以大批量生产,能将成本压至更低)


而用于大部分科研的培养基,从实验成本和实验效果角度出发,绝大部分研究人员还是更偏爱血清培养基。


两大类型培养基的优缺点已经给大家梳理清楚,在选择培养基的时候更可以做到心中有数啦!


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