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支原体DNA抽提Kit特点及操作步骤 -威正翔禹

2023-02-03 16:54
文章附图

在细胞实验中,如果怀疑细胞有支原体污染,可直接取细胞上清进行支原体PCR检测。因为存在支原体污染的细胞上清中,支原体密度为通常为10^6-10^8/ml,已足以用于PCR检测。但有时,支原体检测前,还需对样品中的支原体DNA进行提取。那么,什么时候需要提取呢?

当出现以下几种情况时,建议大家在进行支原体qPCR前,先进行提取支原体提取。

1、细胞培养液中存在抑制PCR的物质,这时就需要提取。细胞培养基中的血清浓度如果超过12%,那么对下游的PCR反应会产生抑制。酚红,对荧光定量PCR的检测也会干扰。这些均可以通过使用Miverva公司的支原体DNA提取试剂盒来克服。

2、对于样品类型是细胞团、疫苗、冻存细胞和石蜡包埋的组织,也需要提前提取DNA

3、另外,如果样品中蛋白含量高于10mg/ml,则先需要用蛋白酶K进行处理。

缔一生物小编今天给大家介绍支原体DNA抽提Kit 英文名称:MinervaVenorGeM Sample Preparation Kit货号:56-1010

德国支原体DNA抽提Kit试剂盒可从细胞上清和生物制品中分离支原体DNA,全程只需30分钟。该试剂盒符合欧洲药典规范。

分四步组成:

**步细胞溶解

第二步DNA特异性与层析柱结合

第三步祛除残留的污染物和抑制剂

第四步洗脱DNA

需要注意的是,常规细菌和哺乳动物细胞的DNA提取试剂盒是否能用于支原体DNA提取,值得怀疑。因为如果都提取出来,则会对下游PCR检测带来干扰。总之,提取后的DNA具有一定的纯度和产率。

缔一生物是德国MB公司国内总代理,助力国内支原体检测!了解更多Minerva微生物污染控制试剂,欢迎访问缔一生物官网:http://www.dyshengwu.com/