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哪類細胞實驗中,應(yīng)特別注意血清內(nèi)毒素含量?

2023-12-12 11:09
文章附圖

細胞培養(yǎng)實驗是很多生物科研的基礎(chǔ),當(dāng)細胞種類是比較珍貴或者嬌氣不容易養(yǎng)好的時候,就需要特別注意天然培養(yǎng)基,動物血清的內(nèi)毒素含量了。

有下列情況者對血清內(nèi)毒素應(yīng)格外留意篩選:

1.養(yǎng)干細胞,干細胞對內(nèi)毒素非常敏感,如果血清中內(nèi)毒素≥3EU/ml時,干細胞很容易死亡。很多使用者,在血清在試用前,就通過提早審核該批次《檢測報告》,以決定是否入圍進行試用。

2.養(yǎng)免疫細胞,過高的內(nèi)毒素可誘導(dǎo)免疫細胞釋放炎癥因子,抑制小鼠紅細胞集落的形成等。

3.基因敲除相關(guān)的細胞實驗,培養(yǎng)的細胞要盡可能保持其原始狀態(tài),任何引導(dǎo)細胞衰老或凋亡的試劑,都會讓后續(xù)的實驗結(jié)果“失之毫厘,謬以千里”。在準(zhǔn)備血清和其他試劑時,選擇極低的內(nèi)毒素(jinliang ≤1EU/ml),對實驗至關(guān)重要;

4.原代培養(yǎng)雜交瘤融合細胞轉(zhuǎn)染,或者肝細胞神經(jīng)細胞內(nèi)皮等難養(yǎng)細胞的擴增,這些都需要挑選好的血清給細胞以有力支持。因此,挑選更低的內(nèi)毒素,是保證實驗順利的基礎(chǔ)

5.實驗室有些細胞,需要長期培養(yǎng)、長期凍存,或者經(jīng)常復(fù)蘇、經(jīng)常培養(yǎng)的,血清會經(jīng)常或長時間作用于細胞。為保證細胞的健康,都應(yīng)該選用更低內(nèi)毒素的血清,以避免內(nèi)毒素長久對細胞的毒性影響。

總之,血清中內(nèi)毒素含量過高,更容易導(dǎo)致細胞“亞健康”,造成數(shù)據(jù)不準(zhǔn),或細胞狀態(tài)不良、老化、甚至死亡,導(dǎo)致試驗中斷失敗。血清中的內(nèi)毒素越低越好。全球細胞培養(yǎng)學(xué)會均依據(jù)內(nèi)毒素對血清的品質(zhì)進行分級和命名。

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實驗人對于新批次血清,應(yīng)認真審閱《檢測報告》,做好試用前篩選準(zhǔn)備。

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