荧光定量PCR仪校准方法

荧光定量PCR分析仪的校准方法主要包括以下步骤：

温度示值误差校准：利用精密温度计对PCR仪的热巢进行实际温度测量，再将其与PCR仪显示温度进行比较，从而得到温度示值误差。

温度均匀度校准：通过在热巢内不同位置放置多个温度传感器，测量各点的温度差异，以评估温度均匀性。

温度波动度校准：在PCR仪完成一轮PCR程序后，测量热巢温度的波动情况，以确定温度波动度。

光学系统物理方法校准：包括Ct值示值误差、Ct值均匀度、Ct值精密度、通道峰值高度一致性、线性灵敏系数、溶解温度漂移和溶解温度比等项目。利用标准品进行荧光定量PCR实验，根据标准曲线对扩增基因进行定量分析，从而得到各项目的校准结果。

荧光强度精密度校准：通过在一定时间内多次记录荧光信号强度，分析其精密度。

样本精密度校准：利用不同样本进行多次荧光定量PCR实验，分析样本的精密度。

荧光线性相关性和样本线性相关性校准：通过分析荧光信号强度与样本浓度之间的线性关系，得到荧光线性相关性和样本线性相关性。

以上信息仅供参考，具体的校准步骤可能因仪器型号和生产商而有所不同。如果您需要更详细的信息，建议参考仪器说明书或联系生产商的技术支持团队。

缔一生物提供的德国MB   荧光定量PCR仪器 检查Kit   qPCR Cycle Check

荧光定量PCR仪器 检查Kit原理

qPCR Cycle Check试剂盒是用于检查验证荧光定量PCR仪的有力工具。它通过对温度敏感的PCR反应来监测荧光定量PCR仪的温度变化。它采用的引物/探针的序列经巧妙设计，能够对温控偏差、温度均一性、温度准确性和耗时极为敏感。温度偏差超过2℃，qPCR的扩增反应即完全停止。它采用常规的qPCR程序，模板的浓度也经过预先设计，只有在qPCR高效时才进行扩增。

背景

PCR结果假阴性或出现非特异性扩增，可能是因为存在PCR仪缺陷。对于GLP（良好实验室规范）实验室，对这两种情况都需要重视。对于正在使用的PCR仪，要保证其正确的温度控制，这通常是一项费力的任务，并且要使PCR仪符合质量管理体系的要求并不容易。

尽管可购买温度传感器，或者有外界提供温度均一性的检测服务，但这种检测并不一定反映PCR仪所有需要控制的参数，因而无法提供可靠的PCR结果。只有设定参考标准才能调查所有相关的过程参数。

qPCR Cycler Check专为验证qPCR仪而设计，以保证仪器的安装合格（IQ）、运行合格（OQ）和性能合格 （PQ）。

荧光定量PCR仪器 检查Kit应用领域

适用于科研实验室和工业质控实验室，可满足GLP、ISO 17025、 ISO 13485、ISO/TS 20836规范要求。

优势

无须额外的设备和软件

适用于任何可检测FAM和ROX荧光通道的qPCR仪

包含所有必需的反应试剂，如冻干型验证反应混合物、复水缓冲液、对照反应混合物。探针带FAM和ROX标记。