熒光定量PCR儀校準(zhǔn)方法

熒光定量PCR分析儀的校準(zhǔn)方法主要包括以下步驟：

溫度示值誤差校準(zhǔn)：利用精密溫度計(jì)對(duì)PCR儀的熱巢進(jìn)行實(shí)際溫度測(cè)量，再將其與PCR儀顯示溫度進(jìn)行比較，從而得到溫度示值誤差。

溫度均勻度校準(zhǔn)：通過(guò)在熱巢內(nèi)不同位置放置多個(gè)溫度傳感器，測(cè)量各點(diǎn)的溫度差異，以評(píng)估溫度均勻性。

溫度波動(dòng)度校準(zhǔn)：在PCR儀完成一輪PCR程序后，測(cè)量熱巢溫度的波動(dòng)情況，以確定溫度波動(dòng)度。

光學(xué)系統(tǒng)物理方法校準(zhǔn)：包括Ct值示值誤差、Ct值均勻度、Ct值精密度、通道峰值高度一致性、線性靈敏系數(shù)、溶解溫度漂移和溶解溫度比等項(xiàng)目。利用標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)擴(kuò)增基因進(jìn)行定量分析，從而得到各項(xiàng)目的校準(zhǔn)結(jié)果。

熒光強(qiáng)度精密度校準(zhǔn)：通過(guò)在一定時(shí)間內(nèi)多次記錄熒光信號(hào)強(qiáng)度，分析其精密度。

樣本精密度校準(zhǔn)：利用不同樣本進(jìn)行多次熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)，分析樣本的精密度。

熒光線性相關(guān)性和樣本線性相關(guān)性校準(zhǔn)：通過(guò)分析熒光信號(hào)強(qiáng)度與樣本濃度之間的線性關(guān)系，得到熒光線性相關(guān)性和樣本線性相關(guān)性。

以上信息僅供參考，具體的校準(zhǔn)步驟可能因儀器型號(hào)和生產(chǎn)商而有所不同。如果您需要更詳細(xì)的信息，建議參考儀器說(shuō)明書或聯(lián)系生產(chǎn)商的技術(shù)支持團(tuán)隊(duì)。

締一生物提供的德國(guó)MB   熒光定量PCR儀器 檢查Kit   qPCR Cycle Check

熒光定量PCR儀器 檢查Kit原理

qPCR Cycle Check試劑盒是用于檢查驗(yàn)證熒光定量PCR儀的有力工具。它通過(guò)對(duì)溫度敏感的PCR反應(yīng)來(lái)監(jiān)測(cè)熒光定量PCR儀的溫度變化。它采用的引物/探針的序列經(jīng)巧妙設(shè)計(jì)，能夠?qū)乜仄睢囟染恍浴囟葴?zhǔn)確性和耗時(shí)極為敏感。溫度偏差超過(guò)2℃，qPCR的擴(kuò)增反應(yīng)即完全停止。它采用常規(guī)的qPCR程序，模板的濃度也經(jīng)過(guò)預(yù)先設(shè)計(jì)，只有在qPCR高效時(shí)才進(jìn)行擴(kuò)增。

背景

PCR結(jié)果假陰性或出現(xiàn)非特異性擴(kuò)增，可能是因?yàn)榇嬖?/span>PCR儀缺陷。對(duì)于GLP（良好實(shí)驗(yàn)室規(guī)范）實(shí)驗(yàn)室，對(duì)這兩種情況都需要重視。對(duì)于正在使用的PCR儀，要保證其正確的溫度控制，這通常是一項(xiàng)費(fèi)力的任務(wù)，并且要使PCR儀符合質(zhì)量管理體系的要求并不容易。

盡管可購(gòu)買溫度傳感器，或者有外界提供溫度均一性的檢測(cè)服務(wù)，但這種檢測(cè)并不一定反映PCR儀所有需要控制的參數(shù)，因而無(wú)法提供可靠的PCR結(jié)果。只有設(shè)定參考標(biāo)準(zhǔn)才能調(diào)查所有相關(guān)的過(guò)程參數(shù)。

qPCR Cycler Check專為驗(yàn)證qPCR儀而設(shè)計(jì)，以保證儀器的安裝合格（IQ）、運(yùn)行合格（OQ）和性能合格 （PQ）。

熒光定量PCR儀器 檢查Kit應(yīng)用領(lǐng)域

適用于科研實(shí)驗(yàn)室和工業(yè)質(zhì)控實(shí)驗(yàn)室，可滿足GLP、ISO 17025、 ISO 13485、ISO/TS 20836規(guī)范要求。

優(yōu)勢(shì)

無(wú)須額外的設(shè)備和軟件

適用于任何可檢測(cè)FAM和ROX熒光通道的qPCR儀

包含所有必需的反應(yīng)試劑，如凍干型驗(yàn)證反應(yīng)混合物、復(fù)水緩沖液、對(duì)照反應(yīng)混合物。探針帶FAM和ROX標(biāo)記。