PCR检测实验室如何避免的假阳性问题出现

PCR检测实验室的假阳性问题主要是由于引物设计不合适、靶序列或扩增产物的交叉污染等原因导致的。

为避免假阳性问题的出现，可以采取以下措施：

引物设计要合适，需选择扩增序列与非目的扩增序列无同源性的引物，并避免选择靶序列太短或引物太短的情况。

避免交叉污染，包括整个基因组或大片段的交叉污染和空气中的小片段核酸污染。操作时应小心轻柔，防止将靶序列吸入加样枪内或溅出离心管外。除酶及不能耐高温的物质外，所有试剂或器材均应高压消毒。所用离心管及样进枪头等均应一次性使用。必要时，在加标本前，反应管和试剂用紫外线照射，以破坏存在的核酸。

在PCR分区中，应设置试剂准备区、样本处理区、扩增区、产物分析区，并确保各分区之间的良好通风。

如果基层PCR实验室没有正负压系统，则要求不同试验区域保持良好的通风，且通风口不能朝向对侧试验区域。

尽量采用巢式PCR方法来减轻或消除假阳性。

遵循以上措施，PCR检测实验室的假阳性问题可以得到有效控制。

缔一生物科技提供的德国MB 产品PCR仪器校正试剂(预分装法)PCR Cycler Check Advance（高阶版）货号：57-2102

PCR仪器校正试剂(预分装法)PCR Cycler Check Advance说明

为保证PCR试验数据准确，PCR仪器应定期校正。

PCR Cycler Check?是用于检测校正PCR仪的试剂盒。

此试剂盒采用对温度敏感的PCR试剂来监测PCR仪温度变化。

其中的引物序列经巧妙设计，能够对温控偏差、温度均一性、温度准确性和耗时极为敏感。温度偏差超过2℃，PCR的扩增反应即完全停止。

模板浓度也经过预先设计，只在PCR反应高效时才进行扩增，这也反映了温控的准确性。

此试剂盒常规PCR仪和荧光定量PCR(qPCR)仪均适用。

PCR仪器校正试剂(预分装法)PCR Cycler Check Advance特点

预混冻干粉已分装于PCR 8连管中。

适用范围

用于科研实验室和工业质控实验室，

以判断是否能达到以下法规对仪器的性能要求，

如：GLP、GMP、ISO 17025、ISO13485、ISO/TS 20836、EN 45001。