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PCR实验室防核酸污染清除方法

2024-01-09 16:21
文章附图

导致PCR实验出现实验假阳性、结果不可信、研发不可靠的重要因素就是DNA气溶胶污染PCR 实验室应当将防污染作为日常管理、实验安排、清洁消毒、实验习惯的核心。PCR 实验污染和细胞污染是有差别的,PCR 实验污染主要是核酸而不是细菌和其他入侵者。因此所有的预防措施都会稍稍有所不同。今天给大家介绍一下 PCR 实验室的主要污染来源、实验中如何避免和减少污染的可能性及PCR实验室防核酸污染清除方法。

1、样本间交叉污染
收集样本的容器被污染或样本密封不严外溢;不同样本移液时忘记更换枪尖或未使用带滤芯枪尖;移液器等实验器具及耗材未及时消毒灭菌;不同样本同时开盖或样本剧烈震荡、反复吹吸导致气溶胶形成扩散,相互交叉污染。

2、实验试剂污染

主要是在 PCR 组分试剂加样过程中,由于移液器、容器、阴性对照及其它试剂被核酸模板或阳性对照污染。 加样过程中,因为 PCR 试剂对温度十分敏感,需要通过冰浴使得 PCR 试剂和 PCR / 管处于 0℃,但这个过程也是充满了污染的风险的。

3、扩增产物污染
大量拷贝的产物泄漏或扩增后的 PCR 反应管意外开盖,这是 PCR 反应中最主要最常见的污染问题。因为 PCR 产物拷贝量大,远远高于 PCR 检测数个拷贝的极限,所以极微量的 PCR 产物污染,就可形成假阳性。

4、克隆质粒污染作为阳性质控品的克隆质粒外溢。

北京缔一生物科技有限公司国内总代理的 德国MB 产品 PCR Clean   PCR 核酸污染祛除喷雾剂(带喷嘴)

PCR CLean Spray.png

在PCR实验室中,DNA污染很难彻底清除。即使只有一个污染的DNA分子被检测到,也会使整个PCR检测过程出现误差。

为确保PCR试验数据准确,预防DNARNA交叉污染,PCR实验室大多会常备DNA/RNA污染清除剂。

核酸污染祛除喷雾剂特点

1.可有效地降解大多数表面上(轻质金属或有色金属除外)的扩增子,质粒或基因组DNARNA。该产品还能有效地去除DNA酶和RNA酶。     

2.可直接使用。

3.保护实验人员,避免接触DNA污染。

4.非碱性,无致癌性,成分安全。

PCR Clean?核酸污染祛除喷雾剂使用方法

1.PCR Clean?喷在操作台表面,反应1分钟后,即可用干净纸巾擦干试剂。注意:如果没有擦拭干净,液体挥发后表面可能有白色残留,影响美观。此时可用喷壶喷洒蒸馏水到白色残留处,然后擦拭即可。

2.对于移液器要祛除DNA/RNA污染时,请按照说明书拆开移液器,将移液器杆轴浸泡在PCR Clean?喷雾剂中,1分钟后取出后用水冲洗,晾干,重新组合。

3.将PCR Clean?桶装,可用于补充到喷雾剂瓶中,或用于洁净间地板等大面积清除DNA/RNA污染。