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什么是荧光定量pcr的绝对定量

2024-05-06 16:02

荧光定量PCR的绝对定量是一种利用荧光信号的变化对PCR过程进行实时监控,从而实现对初始模板的定量分析的方法。在这个过程中,需要使用已知拷贝数的绝对标准品,并制作标准曲线。

需要有一个已知拷贝数浓度的样品作为标准品,将其稀释至少5个梯度(理论上,每稀释10倍,Ct值增大3.33)后和待测样品同时上机进行定量检测。然后,以标准品拷贝数的Log值为横坐标,以标准品的Ct值为纵坐标绘制标准曲线方程。最后,将检测获得的待测样品的Ct值带入标准曲线方程中,就能求得待测样品的拷贝数浓度。

这种方法可以精确地测量出某个基因在初始样品中的具体拷贝数或浓度,为科学研究提供了重要的数据支持。