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加了支原体清除剂还可以用PCR测支原体吗2024-05-15 16:43
支原体对细胞有危害。支原体对细胞的影响是多方面的,主要可以从两个方面来考虑:直接影响:细胞被支原体污染后,可能增殖缓慢,部分细胞变圆并从培养瓶壁脱落。有些细胞虽然表面变化不十分明显,但实际上可能潜伏着多方面的危险。 间接影响:支原体可以通过消耗培养基中的精氨酸,抑制细胞DNA、RNA的合成,降低细胞的抵抗力。此外,支原体感染还会对细胞的代谢、免疫或生化特性、生长状况、酶的作用途径、细胞膜的组成、染色体结构、转染效率以及细胞存活等多方面产生影响。 因此,支原体污染总是会影响研究的发现,并可能浪费大量的科研经费。支原体污染除了来源于其他污染的细胞外,大多数来自于实验室操作人员,因为很多支原体在人体是正常菌群,稍有不慎就可能带入实验室而污染细胞。为了预防和控制支原体污染,实验室需要采取严格的消毒和清洁措施,并定期检测细胞培养物是否受到污染。 因此推荐使用,针对支原体起作用的支原体清除试剂——Mynox? Gold。 Mynox? Gold代表了经典Mynox?试剂的进一步发展,将抗生素和生物试剂与生物物理作用模式相结合,从而尽可能杀灭细胞中的支原体。 与其他细菌细胞相比,支原体没有细胞壁,但被质膜包围。Mynox? Gold中含有的生物试剂可整合到支原体膜中,并损害其完整性。由于这种联合配方,生物试剂和抗生素的有效剂量可以降低到最低的细胞毒性,同时仍然可靠和明确地消除支原体。 支原体去除处理后,不应直接使用基于PCR的检测方法。Mynox? Gold溶解支原体颗粒,随后将支原体DNA释放到培养基中。然后可以通过PCR检测到游离DNA,导致假阳性结果。 Mynox? Gold的效果,受反应混合物中脂质和蛋白质浓度的影响,例如,培养基补充剂的成分,如胎牛血清(FCS)。这些成分竞争性地结合Mynox? Gold中所含的生物试剂,并防止其与支原体膜结合。因此,我们建议,在细胞培养基中使用5% v/v FCS进行。由于血清蛋白和脂质成分的抑制作用,目前还没有针对高蛋白和脂质浓度生物制剂的治疗方案。 细胞培养基的类型不影响处理的效率。抗生素,特别是在需要选择的情况下,可以在治疗混合物中使用。 上一篇: B16F10细胞内参用什么
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