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PCR实验室中的气溶胶污染从何而来?

2024-06-18 17:01

PCR实验室中的气溶胶污染主要来源于两个过程:样本制备过程和PCR扩增过程。

样本制备过程:

样本液体面与空气摩擦时可形成气溶胶。在样本制备过程中,较剧烈地摇动反应管、开盖时、吸样时及加样器的反复吸样都可能形成气溶胶,从而引发污染。

待测强阳性样品,尤其是放置样品的容器被污染或容器密封不严导致样品与外界接触被污染,以及待提取样本中含有高浓度的阳性核酸,也容易形成气溶胶造成污染。

PCR扩增过程:

PCR扩增可以引起实验室中扩增产物的累积。通常一次典型的PCR扩增可以产生高达109拷贝的靶序列,如果气溶胶化,甚至最小的气溶胶都会含有106拷贝的扩增产物。

如果不加以控制,在短期内累积的气溶胶化扩增产物就会污染实验室中的试剂、仪器设备和通风系统。

气溶胶污染在PCR实验室中是一个严重的问题,因为即使是极微量的污染也足以造成实验结果假阳性,进而可能导致临床做出错误的判断和决策,并可能引发后续的医疗事故和恐慌。

为了避免PCR实验室中的气溶胶污染,需要采取一系列严格的实验室管理措施,如建立标准的正负压系统及四分区(或三分区)的PCR实验室,确保在无菌无尘环境下进行操作,以及加强实验室人员的培训和监管等。