天然胎牛血清中含有血小板来源的TGF

　　天然胎牛血清的成分非常复杂，其中含有许多的生长因子。那么小编今天就为您介绍血小板来源的TGF因子。本文威正翔禹/缔一生物为您分析天然胎牛血清中含有血小板来源的TGF。

　　当初发现胎牛血清中含有血小板来源的TGF，还是在1982年5月。美国梅奥临床中心的细胞生物学系的研究小组在PNAS期刊上发表了一篇论文，题为Serum contains a platelet-derived transforming growth factor。在这篇文章里，作者描述了一个现象，体外在半固体培养基如软琼脂上培养AKR-2B细胞（来自小鼠胚胎的上皮细胞）或NRK细胞（来自大鼠的肾上皮细胞）时，添加10%胎牛血清，细胞不会形成克隆。但升高培养基中胎牛血清的含量，细胞就有克隆的产生。胎牛血清浓度越高，细胞生长出来的克隆就越多（见下图）。之前实际上也有人发现，人的成纤维细胞作为一种贴壁细胞，在添加了20%胎牛血清的甲基纤维素中却能悬浮生长，但如果只添加10%的胎牛血清，这种改变就消失了。同时，添加氢化可的松有助于成纤维细胞的悬浮生长。

　　图：血清浓度对细胞在软琼脂上生长的影响。AKR-2B用·表示，NRK用X表示。

　　可见，胎牛血清中确有一些因子，对细胞的生长产生影响。通过AKR-2B细胞或大鼠NRK细胞在软琼脂上生成克隆的现象，作者逐渐鉴定出一种参与这种现象的生长因子。作者首先用45%的饱和硫酸铵对胎牛血清进行了沉淀，发现只有沉淀才有克隆刺激活性，而上清却没有。作者还发现，新生牛血清和小牛血清的沉淀只有胎牛血清的一半的克隆刺激活性。

　　作者进一步用色谱层析的方法，发现沉淀中有一种可溶于酸的组分，其克隆刺激活性特别高，而且对胰蛋白酶和二硫苏糖醇敏感，提示该蛋白可能有二硫键连接。通过发现人血清比血浆的克隆刺激活性高，作者推测凝血反应可能会释放出一种化合物。在用酸/乙醇分别提取了人和牛的血小板成分后，的确发现提取物具有很高的AKR-2B和 NRK克隆刺激活性。作者进一步用色谱纯化了血小板提取物，鉴定出一种组分克隆刺激活性最高，它的分子量在14K至20K之间，与胎牛血清中色谱层析的组分非常近似。作者还尝试了EGF和PDGF，发现都没有针对这两种细胞的克隆刺激活性。作者最终鉴定出该成分为TGF，即转化生长因子。这篇研究报道最终没有说是哪种TGF，但小编推测为TGF-β1。

　　实际上，TGF-β的名字的由来也与该文在介绍部分提到的发现有关，即这种细胞因子能使正常的成纤维细胞的表型发生转化，即在表皮生长因子（EGF）同时存在的条件下，改变成纤维细胞贴壁生长特性而获得在琼脂中生长的能力，并失去生长中密度信赖的抑制作用。

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　　参考文献：

　　HAROLD L. MOSES, et al. Serum contains a platelet-derived transforming growth factor. Proc. NatL Acad. Sci. 1982, 79:5312-5316