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超声两种可混溶流体流之间的细胞分离和运输

2016-10-17 12:52

本文介绍了由acoustophoresis运输细胞或微大小的粒子从一个流体流到另一个二流微流体系统。使用该运输方式,颗粒或不同尺寸和机械性能的细胞可以被分离。经历了较大的声辐射力将细胞分离,并从原来的悬浮液至目标流体流输送。

在实验中使用的声微通道系统示于图Figure4。所述微通道芯片包括一个H形状微通道具有两个入口和两个出口。此信道通过深反应蚀刻制成在硅基(牛津等离子体100的DRIE/ICP系统:200的蚀刻/沉积步骤中,垂直误差±0.1°,100-400nm的侧壁上的起伏幅度),并且它是玻璃顶覆盖。沟道宽度对应于所用的超声波,使驻波被设置在侧壁之间的一半波长。压电陶瓷换能器(闪烁发光陶瓷私人有限公司,印度,共振频率是1.875兆赫**厚度模式)被附连到与覆盖微通道的整个长度的换能器的宽度的通道的底部表面。超声凝胶用于确保换能器和微通道之间的良好耦合。组装的系统是使用LRC计测量,并且所述压电陶瓷的谐振频率被发现是1.88兆赫。该换能器,然后通过使用函数发生器(安捷伦33120A)中的正弦信号驱动。施加在压电陶瓷上的电压是20Vpp的用于所有的实验。在此工作状态下,没有声空化和无声流进行观察,作为声强度被发现是低的(约75毫瓦/厘米2)。此外,由于换能器是由函数发生器没有任何功率放大器直接驱动,该驱动电流非常低,大约几毫安20Vpp的的施加电压。通过压电陶瓷换能器的功耗非常小,并且在实验中没有观察到温度变化。种在流体通道中的流通过顶部玻璃盖通过用CCD照相机(徕卡Vetzlar GmbH的)显微镜观察。在以下的实验研究中所用的流体的典型流率从数百微升/小时至几毫升/小时而变化。这些流率对应于雷诺数在再≈0.3-0.5的范围内,这意味着该通道内的流动是层流。

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细胞样品制备

染色寄生虫的细胞,无论是C的孢子虫和G.鞭毛虫分别与其相应的抗体混合。将混合物在37℃保温30分钟。然后该寄生虫的细胞通过离心收集并重新配制成饮用水溶液。然后将1ml注射器被用于包含细胞的悬浮液,并连接到声芯片的入口。用注射泵(新纪元泵系统商标 )被用于吹扫通道以及对细胞样品流入通道。养细胞,就选Ausbian胎牛血清

细胞分离分析和可行性测试

用于细胞的分离分析,从通道的出口获得的细胞收集并离心。使用血球浓缩的细胞样品进行分析。细胞分离效率被计算为靶寄生虫细胞在该出口处收集的所有寄生虫细胞之间的比例。寄生虫细胞活力测试,将细胞流入不同流速的微通道。从通道的出口获得的细胞立即用碘化丙锭进行混合。下荧光照明,多个绿色和红色染色的细胞使用血球计数。

友情提示:培养细胞所用试剂

英文原文:

Cell separation and transportation between two miscible fluid streams using ultrasound

The acoustic micro-channel system used in the experiments is shown in Figure Figure4.4. The microchannel chip consists of an H-shape microchannel which has two inlets and two outlets. This channel is made by deep reactive etch on a silicon base (Oxford Plasma 100 DRIE/ICP system: 200 etch/deposit steps, vertical error ±0.1°, and amplitude of undulations on side walls of 100–400?nm), and it is covered by glass on top. The channel width corresponds to the half wavelength of the ultrasound used so that a standing wave is set up between the side walls. A piezo-ceramic transducer (Sparkler Ceramics Pte Ltd, India, resonance frequency is 1.875?MHz for first thickness mode) is attached to the bottom surface of the channel with the width of the transducer covering the whole length of the micro channel. Ultrasound gel is used to ensure good coupling between the transducer and the microchannel. The assembled system is measured using a LRC meter, and the resonance frequency of the piezo-ceramic is found to be 1.88?MHz. The transducer is then driven by a sinusoidal signal using a function generator (Agilent 33120?A).

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