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避免小分子的干扰——用透析胎牛血清

2020-07-07 15:16来源:威正翔禹|缔一生物

避免小分子的干扰,用透析胎牛血清

胎牛血清是营养丰富的天然培养基,常用于细胞培养。但有一些特殊的细胞实验,需要避免细胞培养基中一些小分子对实验的干扰。这时,就需要使用透析胎牛血清。

透析胎牛血清是采用透析的方法,过滤去除10KDa以下的小分子(如氨基酸、核苷、胆固醇等),而保留血清中的大分子成分,因而可用于一些特定的细胞实验。

例如,使用放射性标记小分子,对生物合成过程进行监测,以研究蛋白质等大分子的生化性质、合成、加工、细胞内传送、分泌和降解过程。这时,常将细胞放在含有充足养分和放射性标记氨基酸(如35S标记的蛋氨酸或半胱氨酸)的培养液中进行标记。为避免外源未标记的氨基酸的干扰,这时所用的血清就是透析胎牛血清,不含蛋氨酸和半胱氨酸,基础培养基也要求不含蛋氨酸和半胱氨酸。

图.同位素示踪实验

这种方法常见于生化代谢调控与疾病的机理研究。其他常见标记物包括14C标记的丝氨酸、亮氨酸、缬氨酸或32P标记的焦磷酸,这时培养液中的基础培养基和胎牛血清都要求不含有这种小分子。

另一种需要用到透析胎牛血清的情况是稳定转染的细胞株的筛选。最常见的基因工程用细胞株是二氢叶酸还原酶缺陷型(DHFR-)的CHO细胞。CHO(DHFR-)细胞由于不含DHFR,因而只能在含有胸苷、甘氨酸和次黄嘌呤的培养基中才能生长。若将DHFR基因导入这种缺陷型细胞,则细胞能在不含这三种分子的培养液中生长。同时,加入氨甲喋呤(MTX)可刺激DHFR基因大量表达,与之一同转染的外源基因就能大量表达,因而可以获得人们所需的基因工程药物。类似的情况也见于杂交瘤细胞的筛选。

第三种情况是采用报告基因检测系统(常见荧光素酶作为报告基因)进行基因调控的研究时,为避免特定外源小分子(如葡萄糖、激素等)作为基因激动剂的干扰,即需要透析胎牛血清来培养基因转染后的细胞。

下面介绍一款市面上低调的透析胎牛血清-Ausbian品牌

Ausbian?透析特级胎牛血清为澳洲进口,是在当地政府兽医部门的监督下从注册的出口屠场采集,国际GMP品质生产,严格质控,符合国际动物协会要求。

产品描述

1.内毒素更低(<3.0 EU/mL),细胞培养过程更健康。

2.在Ausbian?特级胎牛血清基础上,透析去除10000分子量以下小分子,使细胞试验免除外源小分子干扰。

3. 每批都有提供详尽的检测报告,各项检测指标完整,清晰,实验人员一目了然。

4.从出厂到实验室,全程冷链运输,不出现冻融现象,血清质量能保证。

5.有100ml和500ml大小两种包装,实验人员选择更方便。

6.原装进口的Ausbian透析胎牛血清,到达国内后现货才开始销售,实验室没有国际货运风险。

除了以上小编推荐的产品以外,Ausbian?血清还有:特级胎牛血清、细胞治疗专用胎牛血清、疫苗生产专用胎牛血清、疫苗生产专用新生牛血清、进口特级新生牛血清等一系列产品供客户选择。