德国MB公司的支原体qPCR试剂盒 ——适合药厂检测的金标准

药典对生物药厂的细胞种子批、病毒收获液及细胞治疗产品等都规定要求不含支原体。它是保证生物制品安全和质量的重要指标之一。

但传统支原体检查方法如培养法和DNA染色法都存在一定的局限，如所需时间长，操作较为复杂（培养法），存在假阳性和假阴性的情况（特别是染色法）。

支原体核酸检测法

（包括常规PCR和qPCR）

以其检测时间短（仅需2-3小时）、

灵敏度好和特异性高、

操作简单而广受青睐。

目前国内外药厂放行检测及方法验证

（product release testing）

采用的较多的是德国MB公司的:

支原体qPCR检测试剂盒（经典法)

和支原体常规PCR检测试剂盒（经典法）。

其中，

支原体qPCR检测试剂盒

由于无须跑胶，且能定量，因而更受欢迎。

德国MB公司的

支原体qPCR检测试剂盒（经典法）

被称为支原体检测的金标准，

主要基于以下几个原因：

1. 遵循欧洲药典和日本药典要求。德国MB公司对该试剂盒进行了全面的验证，包括灵敏度、特异性和耐用性，并提供有验证报告，符合欧洲药典（EP 2.6.7）和日本药典（JP G3）规定，因而可替代传统的培养法和染色法。以灵敏度和特异性为例。

经典法qPCR试剂盒对以下欧洲药典规定的9种支原体的最低检测限均达到≤10CFU/ml

经典法qPCR试剂盒一次检测可涵盖所有可能污染细胞的支原体物种（涵盖欧洲药典规定的9种支原体），而对细菌和真核细胞DNA没有交叉反应（见下表）。

2. 经典法qPCR试剂盒含qPCR mix、阳性支原体DNA对照、内控DNA对照，均为冻干粉，稳定性强，复溶后即可使用。内控DNA对照，可监测支原体DNA抽提过程，以及是否存在PCR抑制导致的假阴性。

3. 欧洲和日本药典要求核酸法需包括样品的DNA抽提，再行支原体检测。

德国MB公司的支原体DNA提取试剂盒，具有极好的抽提效果，即使痕量支原体（如10CFU）提取DNA后也可检测出来。在用于工业放行检测时，经典法qPCR试剂盒与该试剂盒配合使用。

4．德国MB公司提供有全面的标准品，用于支原体核酸法的方法验证。

包括10CFU和100CFU支原体灵敏度标准品（用于灵敏度和耐用性验证）、

支原体基因组DNA和细菌基因组DNA（10ng/管，用于特异性验证）、

qPCR绝对定量标准品（1X108基因组拷贝，用于绘制标曲和绝对定量）。

其中支原体灵敏度标准品还提供有GU：CFU比值（支原体基因组/菌落数比值），便于二者的换算。

德国MB公司的经典法qPCR试剂盒兼容许多品牌的qPCR仪，为双通道检测：支原体检测用FAM通道, 内控对照用HEX通道。如仪器没有HEX通道，也可选VIC通道。具体设置请参考厂家的仪器设置文件。

产品信息如下：

存储：2-8℃。复溶后在-18℃以下保存。

配套产品:

存储：室温