预防和清除支原体污染的细胞培养方法

3.对抗生素部分耐药。

4.只有支原体对抗生素耐药。

最后一种情况是最差的，因为支原体可以通过气溶胶传播。在抗生素敏感的情况下，抗生素能防止细菌和真菌繁殖，但从一开始就没有能力预防支原体。因此，在细胞培养中长时间连续使用抗生素，不仅是没有帮助的，而且也会引起很多的问题。然而，在原代培养中，短期（前两周）使用抗生素（青霉素/链霉素），是至关重要的。因为抗生素在培养基中不稳定，强烈建议每隔两三天进行一次换液。

丢弃或治疗支原体污染的细胞

如果被支原体污染的细胞较为珍贵或稀少，建议进行清除支原体的治疗。否则，建议丢弃支原体污染的细胞，因为它们被认为是实验室污染的来源。

被污染的细胞应该丢弃，以避免成为污染源。但对于珍贵的细胞，可使用Minerva Biolabs公司的Mynox Gold?支原体清除剂。Mynox Gold?支原体清除剂是市面上一款具有杀灭作用的清除剂。它提取自枯草杆菌，可与支原体膜特异性结合，破坏膜通透性，导致支原体膨胀破裂而死。使用Mynox?一般在2-3个小时即可完成清除任务。

隔离任何来源的新细胞

正如前面章节中描述，从其他实验室带来的新细胞是污染的主要来源。因此，在新细胞作任何用途之前，有必要隔离细胞，并检查是否有支原体污染。

减少气溶胶的产生

在生物安全柜或细胞培养箱中细胞操作产生的气溶胶，以及人员自身产生的气溶胶，在实验室中都会传播支原体污染。因此，避免产生气溶胶的活动有助于预防细胞培养中的支原体污染。

支原体检查的重要性

根据一些报告，在美国和欧洲，正在培养的细胞或细胞库冻存的细胞中，支原体污染的几率大约是15%至35%。因此，经常进行支原体检查是非常必要的。

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英文原文：

Methods for prevention of mycoplasma contamination in cell culture

Improve aseptic techniques and practices

A precise supervision of new workers in the lab by a skilled operator to follow good aseptic techniques can help to reduce the risk of mycoplasma contamination. It is highly recommended to prepare the reports of all cell contamination incidents to solve the problem of contamination .

Test cultures for contamination